选用甘肃高山细毛羊泌乳母羊为研究对象, 在甘肃省肃南县康乐乡进行为期61 d的冬春季放牧补饲试验。每天09:00至17:00出牧并自由饮水, 归牧后对试验羊分圈补饲, 且每种饲料均无剩余。羔羊小于1月龄时不出牧, 在圈舍中自由采食开食料、羔羊料和苜蓿(Medicago sativa)草粉, 中午母羊归圈哺乳羔羊1次; 小于3月龄的羔羊归牧后舍饲羔羊料和苜蓿草粉, 3月龄时停止补饲, 4月龄时断奶, 并投放至草地上自由采食青草。

选正常健康、体重相近的泌乳期母羊60只, 编号并随机分为4组(Ⅰ 、Ⅱ 、Ⅲ 、CK), 每组15只, 对应组所产羔羊亦分为4组(Ⅰ 、Ⅱ 、Ⅲ 、CK), 每组15只(均为单羔)。颗粒饲料和苜蓿草按精粗比5:5、6:4和7:3分别组成日粮Ⅰ 、Ⅱ 、Ⅲ , 于早晨出牧前、下午归牧后等量饲喂于Ⅰ 、Ⅱ 、Ⅲ 3组羊, 其饲喂量见表1。CK组作为对照组随同其它大群泌乳羊由牧户家自行饲喂。

表1

Table 1

表1(Table 1)

表1 每只羊每天的标准饲喂量(kg· d-1) Table 1 Feed amount (kg· d-1)of each sheep per day 饲喂时间 Foraging time 日粮Ⅰ Diet Ⅰ 日粮Ⅱ Diet Ⅱ 日粮Ⅲ Diet Ⅲ 精料 Concentrate 粗料 Roughage 精料 Concentrate 粗料 Roughage 精料 Concentrate 粗料 Roughage 第1、2天The 1st and 2nd day 0.18 0.18 0.217 0.143 0.253 0.107 第3、4天The 3rd and 4th day 0.36 0.36 0.43 0.287 0.513 0.213 第5-61天The 5th to 61st day 0.54 0.54 0.65 0.43 0.76 0.32 Note: The supplementary feed amount before and after grazing accounts for 50% of the total amount at every day. 注:每天早晨出牧前、下午归牧后的补饲量分别是每天补饲量的一半。

表1 每只羊每天的标准饲喂量(kg· d-1) Table 1 Feed amount (kg· d-1)of each sheep per day

试验日粮是在甘肃肃南牧区牧草采食量测定的基础上, 按照赵有璋《中国养羊学》^[10] 40 kg中国美利奴泌乳母羊泌乳量分别为0.8、1.0和1.2 kg时所需营养物质的饲养标准, 配制了精粗比分别为5:5、6:4和7:3的不同营养水平补饲配方3个。3种日粮都由颗粒饲料和苜蓿干草组成, 其配方(风干样基础)和营养水平见表2。

表2

Table 2

表2(Table 2)

表2 试验日粮组成及营养水平 Table 2 Composition and nutrient levels of experimental diets 项目 Item 日粮Ⅰ Diet Ⅰ 日粮Ⅱ Diet Ⅱ 日粮Ⅲ Diet Ⅲ 精料原料Ingredients/% 玉米Corn 9.16 17.04 28.35 麸皮Wheat bran 25.85 19.79 3.60 胡麻饼Linseed meal 15.85 23.54 37.74 磷酸氢钙CaHPO4 0.22 0.54 0.94 食盐NaCl 0.22 0.27 0.31 苜蓿干草Alfalfa hay 48.69 38.82 29.06 合计Total 100.00 100.00 100.00 营养水平Nutrient level DM/% 90.05 89.74 89.57 CP/% 18.68 19.50 21.35 DE/MJ· kg-1 9.08 9.36 9.67 OM/% 88.22 86.83 85.45 Ca/% 1.12 1.04 1.00 P/% 0.57 0.65 0.72

表2 试验日粮组成及营养水平 Table 2 Composition and nutrient levels of experimental diets

从3种精料的理论营养水平(表2)可以看出, 3种精料的粗蛋白和代谢能依次增加, 组成了低能低蛋白、中能中蛋白和高能高蛋白3种试验日粮。

试验一个月时和试验结束当天, 每组随机挑取6只, 于清晨饲喂前, 用促凝的一次性真空采血管于颈静脉处采血5 mL, 用冰袋低温带回实验室。

1.5.1 血清生化指标测定 葡萄糖(GLU)、尿素氮(BUN)、胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)9个指标。血样送由兰州市长风医院, 采用全自动生化分析仪测定。

1.5.2 母羊体重变化测定 分别于试验开始和结束, 称取试验羊及对照组羊的空腹体重。

1.5.3 羔羊体重变化测定 分别称取试验羊和对照组羊所产羔羊初生重、1月龄、2月龄、3月龄、4月龄、5月龄和6月龄体重。

用SPSS 19.0对试验羊及对照组羊血清生化指标、体重及羔羊日增重进行单因素方差分析, 并用Duncan法进行多重比较, 结果以平均值± 标准误(Mean ± SE)表示, P< 0.05代表差异显著, P< 0.01代表差异极显著。

各指标含量总体上末期较中期均有所提高, 个别指标则相反(表3)。GLU含量中期Ⅲ 组显著高于其余3组(P< 0.05), 且末期的Ⅲ 组极显著高于CK组(P< 0.01)。BUN含量中期和未期CK组均显著高于其余3组(P< 0.05), 但Ⅰ 、Ⅱ 、Ⅲ 3组间无显著差异(P> 0.05)。试验中期血清CHO含量Ⅱ 组极显著高于Ⅰ 组(P< 0.01), 且显著高于Ⅲ 组和CK组(P< 0.05); 末期Ⅱ 组极显著高于CK组(P< 0.01), 且显著高于Ⅰ 组和Ⅲ 组(P< 0.05)。试验中期血清TP、ALB、AST、ALT、LDH以及整个试验期的TG含量, 各组间均无显著差异(P> 0.05)。试验末期血清中TP含量Ⅱ 组和Ⅲ 组均显著高于Ⅰ 组和CK组(P< 0.05), LDH则与之相反(P< 0.05); ALB、AST和ALT含量Ⅰ 、Ⅱ 和Ⅲ 3组均显著高于CK组(P< 0.05)。

表3

Table 3

表3(Table 3)

表3 不同营养水平日粮对泌乳羊血清生化指标的影响 Table 3 Effects of different nutritional levels diets on serum biochemical parameters of lactation ewes 指标 Parameter 采样时间 Sampling Time 组别Group Ⅰ Ⅱ Ⅲ CK GLU/mmol· L-1 中期Metaphase 1.41± 0.07b 1.50± 0.12b 1.83± 0.09a 1.38± 0.05b 末期Telophase 2.70± 0.03bAB 2.95± 0.16bAB 3.59± 0.08aA 2.19± 0.11cB BUN/mmol· L-1 中期Metaphase 6.99± 0.14b 7.48± 0.11b 7.12± 0.18b 8.36± 0.25a 末期Telophase 7.32± 0.23b 7.43± 0.71b 7.40± 0.74b 8.68± 0.34a CHO/mol· L-1 中期Metaphase 1.47± 0.14cB 2.21± 0.13aA 1.77± 0.11bAB 1.87± 0.21bAB 末期Telophase 2.04± 0.21bAB 2.31± 0.32aA 2.03± 0.16bAB 1.76± 0.11cB TG/mmol· L-1 中期Metaphase 0.21± 0.03a 0.23± 0.04a 0.24± 0.02a 0.20± 0.02a 末期Telophase 0.19± 0.02a 0.17± 0.02a 0.20± 0.02a 0.18± 0.01a TP/g· L-1 中期Metaphase 62.50± 0.79a 64.06± 0.74a 62.58± 0.27a 65.32± 0.33a 末期Telophase 63.67± 0.76b 71.33± 0.56a 70.06± 0.85a 61.47± 0.8b ALB/g· L-1 中期Metaphase 27.50± 1.06a 30.44± 0.25a 28.37± 0.41a 28.26± 0.63a 末期Telophase 29.93± 0.31a 30.03± 0.33a 28.17± 0.31a 23.83± 0.60b AST/U· L-1 中期Metaphase 124.31± 2.54a 125.62± 1.94a 129.77± 2.56a 118.50± 2.38a 末期Telophase 125.25± 0.62a 134.00± 1.06a 131.67± 3.12a 106.50± 1.07b ALT/U· L-1 中期Metaphase 20.47± 0.83a 20.50± 1.09a 21.50± 0.34a 19.53± 0.42a 末期Telophase 28.25± 1.60a 29.67± 0.27a 29.10± 1.13a 23.67± 0.96b LDH/U· L-1 中期Metaphase 271.41± 3.38a 264.51± 3.20a 267.44± 1.09a 272.72± 2.17a 末期Telophase 274.5± 3.25a 249.67± 1.31b 248.00± 1.63b 270.00± 0.84a Note: Values with different lowercase or capital letters within the same row are significantly different at 0.05 and 0.01 level, respectively. The same below. 注:同行不同小写字母代表差异显著(P< 0.05), 不同大写字母代表差异极显著(P< 0.01)。下同。

表3 不同营养水平日粮对泌乳羊血清生化指标的影响 Table 3 Effects of different nutritional levels diets on serum biochemical parameters of lactation ewes

试验母羊的平均日增重Ⅲ 组> Ⅱ 组> Ⅰ 组> CK组, 且Ⅱ 、Ⅲ 两组间无显著差异(P> 0.05), 但显著高于Ⅰ 组和CK组(P< 0.05)(表4)。羔羊初生重各组间无显著差异(P> 0.05), 而在6月龄时, Ⅲ 组显著高于CK组(P< 0.05)(表4)。羔羊每个月的日增重整体上Ⅱ 组和Ⅲ 组大于Ⅰ 组和CK组。0~1月龄羔羊日增重Ⅱ 组显著高于Ⅰ 组和CK组(P< 0.05), 2~3、3~4月龄羔羊日增重Ⅲ 组显著高于Ⅰ 组和CK组(P< 0.05), 4~5月龄羔羊日增重Ⅱ 组和Ⅲ 组显著高于CK组(P< 0.05)。而1~2、5~6、0~6月龄羔羊日增重各组之间均无显著性差异(P> 0.05)。总体来看, 羔羊日增重2~3月龄达到最大, 之后便逐渐下降。5~6月龄羔羊日增重Ⅰ 组和CK组有回升的趋势, 而Ⅱ 组和Ⅲ 组呈持续下降趋势。

表4

Table 4

表4(Table 4)

表4 不同营养水平日粮对泌乳羊及羔羊体重变化的影响 Table 4 Effects of different nutritional levels diets on body weight of lactation ewes and lambs 试验羊 Experimental sheep 体重 Body weight 组别Group Ⅰ Ⅱ Ⅲ CK 泌乳羊 Lactation ewe 初始重 Initial body weight/kg 33.07± 1.45a 34.29± 0.83a 35.33± 0.74a 34.58± 0.90a 末期重Final body weight/kg 35.37± 2.11a 37.12± 1.38a 38.36± 1.42a 36.12± 1.67a 日增重Average daily gain/g 37.80± 3.85bAB 46.34± 1.46aA 49.67± 1.49aA 25.23± 2.46cB 羔羊 Lamb 初生重Birth weight/kg 3.67± 0.67a 3.63± 0.39a 3.81± 0.84a 3.74± 0.09a 6月龄重6 month-old weight/kg 31.76± 0.33ab 33.72± 1.16ab 34.38± 0.91a 30.94± 2.76b 0~1月龄日增重0~1 month-old average daily gain/g 150.71± 1.44b 179.24± 3.76a 164.14± 2.08ab 153.13± 1.65b 1~2月龄日增重1~2 month-old average daily gain/g 180.42± 0.93a 181.08± 2.47a 179.34± 0.67a 158.74± 1.42a 2~3月龄日增重2~3 month-old average daily gain/g 171.10± 2.58b 193.46± 2.24ab 203.8± 1.86a 179.09± 3.44b 3~4月龄日增重3~4 month-old average daily gain/g 149.83± 3.83b 170.63± 0.86ab 181.37± 2.37a 148.45± 1.47b 4~5月龄日增重4~5 month-old average daily gain/g 128.81± 1.32ab 139.82± 1.09a 148.20± 0.23a 112.50± 1.58b 5~6月龄日增重5~6 month-old average daily gain/g 129.47± 2.94a 119.31± 1.45a 121.42± 0.38a 136.33± 0.46a 0~6月龄日增重0~6 month-old average daily gain/g 152.49± 1.92a 164.67± 1.54a 166.21± 0.67a 147.78± 1.41a 羔羊成活率Survival ratio/% 100 100 100 100

表4 不同营养水平日粮对泌乳羊及羔羊体重变化的影响 Table 4 Effects of different nutritional levels diets on body weight of lactation ewes and lambs

GLU是机体重要的能量物质, 其含量相对较稳定。本研究显示, 末期GLU含量较中期高, 并且日粮Ⅲ 的摄入也使得血清GLU含量较高, 可能是泌乳后期, 机体自身能量需求增大, 高能高蛋白摄入使GLU顺利合成, 其含量升高, 这与巩峰等^[12]研究结果一致。正常浓度范围内, 高产动物GLU浓度高于低产动物的^[13]。血清BUN是机体氮代谢的一个重要指标, 浓度高说明体内蛋白分解代谢增强, 氮沉积减少或肾功能异常, 浓度低说明氮的利用率高^[14]。本研究对照组母羊血清中BUN含量较高, 可能是日粮的能量较低, 瘤胃内能氮处于负平衡, 使得瘤胃微生物繁殖受抑制导致氨氮过剩^[15]。本研究中各组羊血清BUN含量在6.99~8.68 mmol· L^-1范围内, 与莱芜黑山羊^[16]血清中BUN浓度6.12~10.03 mmol· L^-1接近。

血液中CHO和TG都与能量代谢有关, 是机体贮能的重要方式。若肝细胞长期受损或营养长期过剩, 会导致血液中CHO和TG含量上升, 不利于动物体的生长代谢^[17]。本研究中, TG含量基本稳定, 而CHO含量日粮Ⅱ 摄入组较其它组高, 但在正常范围2.0~3.4 mmol· L^-1内变化^[18], 可能是日粮Ⅱ 的能量和蛋白水平较高, 使之转换为脂肪存贮于体内, 而能量和蛋白过高会引起机体自身的代谢不适, 所以CHO含量有所降低。说明日粮Ⅱ 的摄入有利于动物体能量的贮存, 蛋白和能量过高反而不利于能量贮存^[12]。TP和ALB含量反映机体蛋白质的吸收和代谢情况, 本研究中期血液TP和ALB含量各组间无显著差异, 而末期TP日粮Ⅱ 和Ⅲ 摄入组显著高于其余两组, 原因是试验中期羔羊较小, 主要靠母乳满足其营养需要, 使得母羊泌乳量都比较大, 能够充分利用补饲料, 而试验后期母羊泌乳量有所下降, 羔羊也可通过采食草料来补充自身营养需要, 使得母羊对不同饲料的利用率出现差异, 并且日粮Ⅱ 和Ⅲ 的可降解蛋白较多, 充足的碳水化合物进一步保证了蛋白质的消化与利用。合理的补饲可以显著增加绵羊血液中TP和ALB含量, 有利于机体对蛋白质的消化吸收^[19]。

AST和ALT通过转氨基作用, 在转氨酶的辅助下参与了蛋白质的代谢^[20]。正常情况下, 血液中AST和ALT的含量基本恒定, 因为二者的活性可反映肝脏和心脏的功能是否正常^[21]。本研究中期各组羊血清AST和ALT的含量无显著差异, 但在末期, 对照组的显著低于试验组, 可能与对照组的日粮组成及营养成分比例等因素有关。这说明试验日粮蛋白水平增高, 血清蛋白也随之增高, 从而AST和ALT的活性也有所增加, 保证了蛋白质的正常代谢, 冷静等^[22]补饲努比亚母羊时发现, 浓缩料组和精料组的AST和ALT活性要显著高于尿素组, 与本研究结果一致。血清中LDH的活性高低反映了机体的应激敏感性。本研究中期各组羊血液LDH含量均无显著差异, 而在末期, 中高能量蛋白日粮摄入组显著高于低能量低蛋白摄入组; 秋季时期, 低能量水平组多浪羊的LDH含量也显著低于中高能量组的^[23], 说明春季合理的补饲非常重要。

肃南牧区绵羊长期缺乏营养, 整体较为偏瘦。本研究中, 中高能量蛋白日粮摄入组母羊的平均日增重显著高于低能低蛋白摄入组, 随能量和蛋白水平的升高, 日增重呈正增长趋势。因为绵羊长期处于困乏状态, 补饲高质量饲料可使泌乳母羊体重逐渐增加^[24]。而中高两组间差异不显著, 说明日粮的能量蛋白水平在一定范围内, 与母羊的体重增长呈正相关。

本研究中, 羔羊6月龄平均体重Ⅲ 组显著高于对照组, 而其它各组之间均无显著差异, 可能与哺乳前期母羊的泌乳量、羔羊瘤胃发育及小肠吸收消化有关^[25]。从羔羊每个月的日增重来看, 0~1、2~3、3~4和4~5月龄羔羊日增重Ⅱ 组和Ⅲ 组高于其它两组, 其中2~3月龄日增重最大, 是因为羔羊2月龄时, 瘤胃等消化器官发育成熟, 可充分利用混合日粮和母乳^[26]。王星凌等^[27]用不同蛋白水平日粮饲喂荷斯坦奶牛时发现高蛋白水平组的产奶量极显著高于低蛋白水平组, 本研究Ⅱ 组和Ⅲ 组母羊摄入日粮蛋白水平较高, 相应泌乳量也较大, Colmenero和Broderick^[28]饲喂蛋白水平在13.5%~19.4%的饲粮测定奶牛产奶量, 也得出相同的结论。羔羊在3月龄时停止补饲, 4月龄时断奶, 故2~3月龄羔羊日增重最大, 之后便逐渐减小。一定范围内蛋白摄入越多, 则泌乳量越大, 泌乳水牛进食氮水平与水牛标准乳产量呈二次曲线关系^[29]。滩× 寒杂种母羊的泌乳量与羔羊日增重呈正相关, 但随着泌乳期的延长, 母羊的泌乳量会随之减少^[30]。5~6月龄羔羊日增重Ⅰ 组和CK组有回升趋势, 而Ⅱ 组和Ⅲ 组呈持续下降趋势, 可能是由于Ⅱ 组和Ⅲ 组母羊摄入的蛋白和能量较高, 泌乳量较大, 使羔羊对母乳产生依赖, 导致断奶后羔羊采食时出现不适反应, 继而日增重持续下降。